一、应用可溶性物表面贴敷促进创面愈合（论文文献综述）
刘威[1]（2021）在《预处理的外泌体对骨质疏松骨整合及糖尿病创面修复作用的研究》文中提出第一部分miR-20a预处理的MSC来源的外泌体通过靶向BAMBI增强成骨作用来促进钛合金的骨整合的研究背景:骨质疏松症患者由于不良的骨整合而具有较高的植入物松动风险,可能造成植入物断裂、植入物翻修和骨折等不良后果。RNA干扰（RNA interference,RNAi）疗法是一种新兴的表观遗传疗法,在这项研究中,我们发现mi R-20a可以增强成骨分化作用。此外,源自人骨髓间充质干细胞（Human bone marrow derived mesenchymal stem cells,h BM-MSC）的外泌体（Exosomes,Exos）被用作保护和递送mi R-20a（Exo-20a）的纳米载体。本研究将探讨过表达mi R-20a的Exos是否可以改善骨质疏松性骨整合以及其潜在的机制。方法:为了评估Exo-20a对成骨的影响,我们进行了体外和体内研究。在体外,我们首先证明了mi R-20a在成骨过程中被上调,并且通过转染方法获取过表达mi R-20a的Exo-20a。然后,通过CCK-8分析、碱性磷酸酶染色、茜素红染色、q RT-PCR和Western blot实验,检测Exo-20a对h BM-MSC增殖、迁移和成骨分化的作用。在体内,我们建立了骨质疏松性骨缺损模型,并通过Micro CT、顺序荧光标记和组织学分析评估了Exo-20a对骨形成的影响。为了进一步探讨生物学机制,研究了BAMBI在mi R-20a成骨效应中的作用。结果:通过过表达进行预处理的方法在体外成功构建了Exo-20a,并证明其可促进h BM-MSC的迁移和成骨分化。在体内实验中,Exo-20a能够促进骨质疏松大鼠模型的骨整合。为了进一步阐明相关机制,我们证明了Exo-20a可以通过靶向BAMBI来增强成骨作用。结论:以上体外和体内结果证实,以h BM-MSC为基础的Exo-20a可通过靶向BAMBI发挥促成骨作用,进而有效促进骨质疏松大鼠植入物的骨整合。第二部分褪黑素预处理的MSC来源的外泌体通过靶向PTEN/AKT通路来调节巨噬细胞M1和M2极化,从而改善糖尿病慢性伤口的愈合目的:糖尿病患者骨科手术后,其伤口可能会因为炎症而延迟愈合,而这会增加手术感染的风险,目前尚无安全有效的方法来解决此问题。h BM-MSC来源的Exos已被证明能够通过抗炎作用来治疗糖尿病伤口。在这项研究中,我们探讨了用褪黑素（Melatonin,MT）预处理的MSC来源的外泌体（MT-Exo）是否可以有效促进糖尿病伤口的愈合,并且阐明产生这种作用的潜在机制。方法:为了评估MT-Exo的抗炎作用,我们进行了体外和体内研究。在体外研究中,我们通过ELISA检测了Raw264.7细胞上清中炎症相关因子的水平,包括IL-1β、TNF-α和IL-10,通过q RT-PCR检测了Raw264.7细胞中IL-1β、TNF-α、IL-10、Arg-1和i NOS的相对基因表达情况,并通过Western blot研究了Raw264.7细胞中PTEN、AKT和p-AKT的蛋白表达情况。在体内研究方面,我们建立了小鼠气囊模型和链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）诱导的糖尿病伤口模型,并通过流式细胞计数、伤口大体观拍照、H&E染色、Masson三色染色、免疫组织化学染色、免疫荧光以及q RT-PCR检测α-SMA、I型和III型胶原的表达,进而评估MT-Exo对糖尿病伤口修复的的作用。结果:与PBS、LPS和Exo组相比,MT-Exo显着减少了Raw264.7细胞分泌的促炎因子IL-1β和TNF-α,并降低了Raw264.7细胞中IL-1β、TNF-α和i NOS的相对基因表达,同时促进了Raw264.7细胞抗炎因子IL-10的分泌,增强了Raw264.7细胞中抗炎因子IL-10和Arg-1的相对表达水平。在机制方面,MT-Exo通过增加PTEN的表达并抑制AKT的磷酸化来增加M2极化与M1极化的相对比值,进一步实现抗炎作用。同样,MT-Exo通过抑制炎症反应显着促进了糖尿病伤口的愈合,从而进一步促进了体内伤口愈合、再上皮化、血管生成和胶原蛋白的合成。结论:MT预处理的MSC来源的外泌体可通过抑制炎症反应来促进糖尿病伤口的愈合,这是通过激活PTEN/AKT信号通路增加M2极化与M1极化的相对比值来实现的,因此MT的预处理的MSC来源的外泌体有希望成为糖尿病伤口愈合的新策略和新疗法。
谌程程[2]（2021）在《c-Cbl对长期扩增培养的BM-MSCs用于促进血管生成及糖尿病创面愈合的影响》文中认为研究背景和意义:足部溃疡创面经久不愈是糖尿病（diabetes mellitus,DM）患者容易罹患的严重并发症之一,这种以周围神经损害及缺血为特征的足部溃烂,临床上称之为糖尿病足。研究显示糖尿病人群中并发糖尿病足的患者比例从15%到20%不等,这其中大约20%的患者需要接受截肢治疗[1],而截肢对患者来说是心理和生理的双重打击。糖尿病溃疡创面延迟愈合涉及多种复杂机制,目前关于糖尿病足部溃疡的病理研究主要集中在微生物侵袭、再上皮化障碍、持续的炎症反应和免疫功能受损等一些致病因素上[2,3]。而血运障碍是伴随所有糖尿病溃疡形成的另一个潜在致病因素,血运障碍会严重影响创面的正常愈合,多项研究强调了充分的血运和血管生成在组织修复中的重要性,并认为局部血管生成障碍和血供减少是糖尿病慢性创面愈合延迟的重要病理改变之一[4-6]。因此,加强创面血管生成反应的治疗策略可能可以有效地促进糖尿病慢性创面的愈合。血管生成是一个由内皮细胞（endothelial cells,ECs）、与其相关的血管周围支持细胞（血管平滑肌细胞和周细胞）以及免疫细胞协调参与的动态过程。血管生成失调已被认为是多种疾病的共同病理改变,包括癌症、外周动脉疾病、糖尿病性血管病变、类风湿性关节炎和炎症性肠病等[7-10]。血管生成受到生长因子、细胞内信号和细胞外成分的微妙和动态平衡关系的调节。多种类型的细胞（包括内皮细胞、平滑肌细胞、成纤维细胞、血小板、免疫细胞和干/祖细胞）可通过分泌相关生长因子参与这一过程,其中发挥主要作用的是碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,b FGF）[11]、转化生长因子α[12]、转化生长因子β[13]、肿瘤坏死因子α[14]、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）[15-17]和磷脂酶C-γ（phospholipase C gamma,PLCγ1）[18-20]等。骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs）具有分化、旁分泌及免疫调控等功能,被认为在血管生成的过程中起到重要作用[21]。此外,Shin等人的研究发现在糖尿病动物模型中内源性间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）的功能受损、以及迁移到受损创面的细胞数量明显降低是导致创面难以愈合重要因素之一[22]。目前已发现MSCs通过促进血管生成加速创面愈合的几种机制,包括分泌促血管生成因子、向内皮细胞和（或）周细胞分化促进血管生成、募集内源性干/祖细胞、调控细胞外基质产生和重塑以及免疫抑制作用等[23]。近年来,外源性MSCs在多种疾病动物模型中的治疗效果,特别是在创伤和缺血性疾病的治疗上受到了广泛的关注[24-26]。多项动物实验研究表明,外源性MSCs的注射治疗可以通过促进创面基底血管生成来加速糖尿病等慢性创面的愈合[27,28]。但是,从组织中获取的原代MSCs,其细胞生物学功能在经过体外培养和增殖后大幅降低,导致治疗效果低于预期[29]。因此,亟待寻找一种方法来增强长期扩增培养BM-MSCs的修复功能,并通过动物实验进一步检测其对糖尿病创面的促愈合作用和安全性。c-Cbl（c-Casitas b-lineage lymphoma）是细胞中的一种原癌基因,属于Cbl家族的成员之一,其编码的蛋白被认为是一种E3泛素连接酶且包含特征性的环指（RING Finger,RNF）结构域,能够调控细胞膜表面受体介导的多种信号[30,31]。实验证实在肿瘤及视网膜血管新生的病理过程中,抑制c-Cbl可以增强VEGF诱导的内皮细胞增殖和血管生成,从而促进这一进程[19]。另外,研究还发现在糖尿病小鼠模型中,敲除c-Cbl基因可以改善高脂饮食诱导的肥胖和胰岛素抵抗[32]。这些结果提示,c-Cbl能够通过调控信号分子转导影响细胞的功能改变进而参与血管生成的过程,并且c-Cbl基因在糖尿病动物模型中也起到重要作用。然而,c-Cbl在BM-MSCs及其长期扩增培养后的功能变化中是否起到作用,起到何种作用,目前尚不清楚。因此,在本文中我们通过向SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）并以血糖值建模标准筛选Ⅰ型糖尿病大鼠,用于制作创面模型。通过体外实验研究c-Cbl在长期扩增培养的BM-MSCs功能改变中的作用,并在动物模型上观察经过调控的BM-MSCs对促进糖尿病创面愈合的作用。研究结果对MSCs在糖尿病等慢性创面治疗的应用上具有重要意义,并为改善MSCs在体外扩增培养后的功能降低提供理论依据。此外,探索c-Cbl对MSCs促血管生成功能的调控作用,可以更好的阐明MSCs的功能变化与血管生成的关系,具有一定参考价值。实验研究方法:1.体外扩增培养大鼠BM-MSCs,检测c-Cbl与蛋白激酶B（Akt）的活化水平及相互作用关系将购买的Sprague-Dawley（SD）大鼠BM-MSCs在体外进行扩增培养,通过蛋白免疫印迹（western blot,WB）法分别检测传第3代（passage 3,P3）、传第6代（passage6,P6）及传第10代（passage 10,P10）细胞中Y731c-Cbl/c-Cbl和S473-Akt/Akt的蛋白表达水平;并且在P10细胞中使用锁核酸修饰的反义寡核苷酸间隔物（locked nucleic acid modified antisense oligonucleotide gapmers,LNA Gapmers）抑制c-Cbl表达,再次检测S473-Akt/Akt的蛋白表达变化。2.观察c-Cbl对长期扩增培养的BM-MSCs旁分泌血管生成因子及迁移能力的影响通过酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）分别定量P3、P10及抑制c-Cbl表达后的P10 BM-MSCs在体外培养过程中分泌血管内皮生长因子A（vascular endothelial growth factor A,VEGFA）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）及b FGF的水平,同时采用小管形成试验分别检测内皮细胞在各组细胞条件培养液中形成血管样结构的程度变化。另外,采用Transwell试验检测各组细胞的迁移功能。3.观察c-Cbl对长期扩增培养的BM-MSCs增殖及衰老的影响采用β-半乳糖苷酶染色试剂盒分别对P3、P10及抑制c-Cbl表达后的P10 MSCs进行染色,以检测衰老细胞的比率。采用CCK-8（cell counting kit-8）试验检测各组细胞分别在24、48、72及96小时的细胞增殖速率。4.构建糖尿病大鼠创面模型首先我们以65mg/kg剂量对SD大鼠进行腹腔注射STZ,诱导构建Ⅰ型糖尿病大鼠模型。然后,以1.8cm的直径在大鼠背部制作对称的两处圆形皮肤全层创面。术后1天在创面周围注射BM-MSCs进行治疗干预。5.观察c-Cbl对长期扩增培养的BM-MSCs促进糖尿病创面血管生成的影响分别予糖尿病大鼠创面组织周围注射下调c-Cbl表达的P10 BM-MSCs（转染c-Cbl LNA Gapmers）、阴性对照P10 BM-MSCs（转染Scramble LNA Gapmers）及等量磷酸缓冲盐溶液（phosphate buffer saline,PBS）,采用免疫组化的方法检测术后7天和14天创面组织中血小板-内皮细胞粘附分子（platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31）和VEGFA的表达,以判断创面血管生成情况。6.观察c-Cbl对长期扩增培养的BM-MSCs促进糖尿病创面愈合的影响分别予糖尿病大鼠创面组织周围注射PBS、P10及抑制c-Cbl表达后的P10 MSCs,在创面制造后0、3、7、14天拍照并计算创面愈合率。另外,收集术后14天创面组织制作石蜡切片进行苏木精-伊红（hematoxylin and eosin,HE）染色和马松（Masson）染色,并统计病理评分。实验结果:1.体外长期扩增培养的BM-MSCs中,c-Cbl的磷酸化水平明显增加而Akt的磷酸化水平受到抑制,c-Cbl LNA Gapmer转染能够下调c-Cbl的蛋白表达水平,并且c-Cbl下调后,Akt的磷酸化水平得到提高,表明c-Cbl在一定程度上介导了体外长期扩增培养诱导的BM-MSCs的磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/Akt信号抑制。2.体外长期扩增培养的BM-MSCs,其旁分泌血管生成因子和迁移能力受到抑制,而下调c-Cbl的表达可改善其旁分泌和迁移能力。3.体外长期扩增培养的BM-MSCs增殖能力降低并呈现较高的衰老率,而下调c-Cbl的表达可增强其增殖能力并在一定程度上降低衰老率,但并没有过度激活MSCs的增殖活性。4.成功构建了STZ诱导的Ⅰ型糖尿病大鼠,并在此基础上制作了糖尿病大鼠创面模型,模型构建的成功率高、稳定性强。5.下调c-Cbl的表达提高了体外长期扩增培养的BM-MSCs对促进糖尿病创面血管生成的治疗效果,与对照组相比,局部注射c-Cbl下调的BM-MSCs可以显着促进创面组织中VEGFA的早期表达,并最终促进糖尿病创面的血管生成。6.下调c-Cbl的表达提高了体外长期扩增培养的BM-MSCs促进糖尿病创面愈合的速率。另外,通过HE及Masson染色统计分析的组织病理评分显示,经c-Cbl下调的BM-MSCs治疗后,创面评分明显高于对照组。结论:1.下调c-Cbl的表达可以改善BM-MSCs长期扩增培养后的Akt磷酸化抑制及促血管生成相关功能降低,表明c-Cbl的表达水平与BM-MSCs的Akt信号和功能变化具有一定的相关性。2.下调c-Cbl的表达提高了体外长期扩增培养的BM-MSCs对糖尿病大鼠创面的促血管生成及促愈合的治疗效果。
赵新哲[3]（2021）在《纤维基复合功能敷料的制备及性能研究》文中认为由于各种自然及人为等造成皮肤损伤时,皮肤的正常生理功能和屏障作用遭到不同程度的破坏,同时会引起不良反应,比如伤口感染,水分流失,温度控制系统失调,失血过多等。此时,敷料可以被用来覆盖伤口,保证机体功能正常的同时,促进伤口的愈合。此外,临床调查表明,81%的患者表示在敷料更换过程中,会由于伤口和敷料之间的粘连感受到不同程度的疼痛感,新生的上皮组织也会遭到一定程度的破坏,从而影响整个伤口的愈合过程。因此,除了基本的透气、保湿功能外,阻止细菌感染、促进伤口愈合和防止敷料粘连是设计创面敷料时需要重点考虑的功能。纳米纤维是一种具有三维网状结构的多孔材料,其作为伤口敷料具有以下优势:比表面积和孔隙率都比较高,有利于吸收渗出液,能够保证伤口处的气体交换;尺寸和形态与细胞外基质的结构类似可以提供合适的伤口愈合环境;良好的载体,可以实现药物的缓慢释放;和伤口的贴合性更好,不会造成患者不适感也更加能够阻挡外界细菌的侵入等。基于上述原因,本论文设计制备了一系列具有不同功能类型的纳米纤维膜,并对纳米纤维膜的相关功能性进行评价。最后,针对纳米纤维膜单位面积吸液能力差的问题,将制备的纳米纤维膜和海藻酸钙无纺布进行复合,制备多层复合创伤敷料,并对其应用性能和动物实验进行评价。主要的研究内容如下:针对敷料的促进伤口愈合功能,制备了仿天然细胞外基质组成和结构的纳米纤维膜。选用牛肌腱I型胶原为原材料,以不同比例的六氟异丙醇（HFIP）和乙酸（HAc）混合溶液为溶剂,系统探索了胶原的溶解、静电纺丝及三螺旋结构的影响因素,为其产业化应用提供了科学系统化的路线。结果表明通过溶剂优化选择后,不仅可以获得均匀连续的胶原（Col）/聚环氧乙烷（PEO）纳米纤维,同时保证胶原的三螺旋结构可以保留60%以上,实现了可纺性和三螺旋结构之间的平衡,保证了胶原纳米纤维的良好生物活性。在获得均匀连续的Col/PEO纳米纤维后,系统研究了Col/PEO纳米纤维膜的交联方式及参数对其性能的影响。将制备的Col/PEO纳米纤维膜分别进行了戊二醛（GA）蒸汽交联及1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）乙醇溶液交联,研究了不同交联方式及交联参数条件下纳米纤维膜在液态环境下的结构稳定性、拉伸性能、凝血性能及细胞增殖性能。对比分析了GA和胶原氨基之间形成Schiff碱、EDC/NHS交联剂“协助”胶原内部形成酰胺键两种交联方式对Col/PEO纳米纤维膜性能的影响机制,验证了两种化学交联的原理及“交联距离”的差异对胶原稳定性的影响。结果表明EDC/NHS乙醇溶液交联后的纳米纤维膜更能促进细胞的增殖,其力学曲线为“J”型,更加复合人体结构的拉伸曲线特性,同时,EDC/NHS乙醇溶液交联后的纳米纤维膜在液态环境下的溶胀更加“均匀”。针对Col/PEO纳米纤维由于胶原在促进细胞增殖的同时也会成为细菌的营养物质从而引起细菌滋生的问题,以及抗生素使用仍存在耐药性的问题,采用天然抗菌剂壳聚糖（CS）和胶原进行混纺制备Col/CS/PEO纳米纤维膜。一方面利用壳聚糖的游离氨基和细菌表面带负电生物分子作用赋予敷料一定的抗菌性,另一方面发挥壳聚糖的促凝血功能,与胶原协同作用赋予敷料更加优异的止血功能。结果表明当壳聚糖含量高于60%时,Col/CS/PEO纳米纤维混纺膜具有90%以上的抑菌率。通过不同壳聚糖含量的纳米纤维膜的体外凝血指数（BCI）及凝血后样品SEM测试,分析了胶原及壳聚糖基于不同止血机理在混纺纳米纤维膜中的协同促凝血作用。针对防止敷料和伤口粘连,以纳米氧化锌（ZnO）为防粘连材料,基于纳米ZnO对水的亲和力比较好,其可以和周围环境中的水分子相结合,在材料表面形成类似的“水化层”,从而降低蛋白吸附及细胞粘附达到防粘连的效果。本文制备了PVDF/ZnO复合纳米纤维膜,讨论了不同PVDF和ZnO质量比的纳米纤维膜性能的影响,并在体外建立了细胞粘附和明胶蛋白凝块剥离强力试验评价了纳米纤维膜的防粘连性能。成纤维细胞的粘附结果表明,纳米ZnO的加入可以显着降低蛋白吸附量,从而降低细胞的粘附;明胶蛋白凝块剥离测试结果表明,纳米ZnO在纳米纤维膜上的均匀分布可以显着降低模拟伤口渗出液在其上的粘附,充分证实了纳米ZnO的防粘连性能。此外,当纳米ZnO占PVDF的质量分数为5%时,PVDF/ZnO复合纳米纤维膜具有优异的抗菌性,而PVDF/ZnO复合纳米纤维膜浸提液没有明显的细胞毒性,也不会造成溶血的发生,具有良好的生物相容性。针对纳米纤维膜单位面积吸液量不大的缺陷,基于“离子交换”原理,对海藻酸钙无纺布进行表面Na+溶液喷洒,交换Ca2+后形成凝胶粘接点,从而提供一种安全无毒且有效的敷料复合制备方式。分别对Col/PEO、Col/CS/PEO以及PVDF/ZnO三种纳米纤维膜和海藻酸钙无纺布的复合敷料的单位面积吸液量、水蒸气透过率以及凝血性能进行评价。结果表明,以凝胶粘接点复合后的敷料成型良好,复合体系具有更加优异的吸液性能,水蒸气透过率虽然有一定程度的降低,但是仍保持在适合的范围内。此外,复合敷料均具有优异的凝血性能。最后,对Col/CS/PEO纳米纤维膜和海藻酸钙无纺布复合功能敷料进行了大鼠背部全皮层伤口愈合实验,以商用胶原泡沫敷料为阴性对照组,分别对伤口面积、伤口组织切片以及伤口愈合涉及的三种生长因子EGF、bFGF和TGF-β的表达进行了表征和评价。结果表明复合功能敷料的伤口愈合率显着高于商用对照组,复合敷料在伤口愈合的前期,可以有效促进上述三种生长因子的表达,从而显着缩短伤口愈合时间,证实了复合功能敷料有效促愈性和安全性。
聂伟[4]（2019）在《功能化仿生矿化三维支架在难治愈性骨缺损治疗方面的研究》文中研究说明由创伤、感染和肿瘤导致的难愈合性骨缺损的治疗一直是临床上所面临的一个难题。自体骨移植是相关骨缺损治疗的黄金方案。不过,有限的供体来源制约了其广泛应用。以聚合物材料为基体的多种骨组织工程支架在常规骨缺损的移植治疗中已经取得了良好的效果。但是,在一些创伤和疾病的胁迫下,缺损骨组织的微环境被扰乱,常规支架材料的治疗效果往往很有限。生物材料和再生医学的快速发展为以上问题的解决提供了新的视角。石墨烯作为一种经典的二维材料,由于其良好的成骨活性,在骨组织修复领域引起了极大的关注。特别的,石墨烯基材料易于组装和修饰,是一种良好的功能化平台。本课题采用石墨烯材料为本体单元,针对不同类型难愈合骨缺损的病理特点,构建了一系列功能化的仿生矿化三维多孔支架,并对其理化性质和体内外成骨活性进行了表征,为相关类型的骨损伤提供了一个新的治疗途径。本课题研究内容概括为以下3个部分:（1）以大面积急性骨缺损的治疗为目标。利用氧化石墨烯（Graphene oxide,GO）和纳米羟基磷灰石（Nano-hydroxyapatite,HA）为反应物,通过水热法诱导GO在还原过程中发生自组装,构建了还原氧化石墨烯/纳米羟基磷灰石（nHA@RGO）三维多孔支架。通过检测反应前后溶液的丁达尔效应,发现在还原过程中,nHA被完全负载到所形成的支架中。使用场发射扫描电镜（Field emission scanning electron microscope,FESEM）观察了支架表面的形貌,结果显示纳米羟基磷灰石的掺杂量对支架的形貌有较大的影响。随着nHA的掺杂量从20%逐渐升高到80%,原本清晰的多孔的结构逐渐变得模糊。同步的表面元素分析不仅定性的揭示了nHA在支架上的均匀分布而且还定量的确证了支架多孔结构的变化与nHA负载量的关系。透射电镜（Transmission electron microscope,TEM）的检测结果表明nHA在反应前就有可能与GO形成了复合物,而且nHA投料量与nHA在GO上的负载密度呈正相关,这为研究这一类型的自组装原理提供了一定的数据支撑。进一步的傅里叶红外光谱（Fourier infrared spectroscopy,FTIR）和X射线衍射（X-ray diffraction,XRD）从组成和结构上研究了所制备支架的物理化学性质,最终证明了nHA@RGO支架的成功制备。以大鼠的骨髓基质细胞（Rat bone marrow stromal cells,rBMSC）为模型细胞,通过体外的粘附、增值和诱导分化实验,发现当nHA的掺杂量为20%时,所制备的nHA@RGO多孔支架具有最好的促细胞扩增能力和成骨活性。在接下来的体内组织包埋中,各种组织学和血液学指标表明所制备的支架不仅在细胞层面上具有优异的相容性,而且体内的植入也不会引起坏死和炎症,具有良好的组织相容性。最后,利用兔原位颅骨缺损模型,对nHA@RGO支架的原位再生能力进行了详细的研究。不同时间点的组织学和影像学数据均表明,相对于纯RGO支架,20%nHA@RGO能显着的加速胶原沉积,缩短类骨质成熟时间,促进缺损创面愈合,是一种潜在的治疗大面积急性骨缺损的组织工程支架。（2）以多药耐药性细菌引起的感染性骨缺损为治疗目标,在第一章的研究基础上,改进自组装的方法,以抗坏血酸为还原剂,在较低的温度下诱发了GO的自组装。同时,除了nHA,还在自组装体系中添加银离子,使其与GO同步还原,最终在所制备的三维多孔支架（A）中负载了具有极强抗菌能力的纳米银颗粒（Nano silver particles,AgNPs）,成功的制备了负载纳米银颗粒的石墨烯三维多孔支架（AgNPs-nHA@RGO,AHRG）。通过扫描电镜（Scanning electron microscope,SEM）观察了材料的表面形貌,发现所形成AgNPs呈颗粒状均匀的分布在支架孔道表面。元素面扫描图谱分析显示,在支架表面分散着钙（Ca）、磷（P）、银（Ag）和碳（C）等元素。X射线光电子能谱（X-ray photoelectron spectroscopy,XPS）以及选区电子衍射（Selected area electron diffraction,SAED）的实验结果中发现了复合物中Ag单质存在的证据,在结构和电子能态上证明了复合体中AgNPs的形成。以临床上收集的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA）为模型细菌,采用平板抑菌圈法和细菌动态培养法系统的研究了AHRG的抗菌性能,结果发现当支架中的AgNPs负载量为4%时,支架具有较好的生物相容性和抗菌能力。这种抗菌作用在细菌生物膜抑制试验中亦得到了进一步的证实。此外,与RGO的结合还使得制备的AHRG支架表现出较强的持续抗菌效果。即使在中性磷酸盐缓冲盐（PBS,pH=7.0）中连续洗脱2周以后,复合支架仍然具有一定的抗菌活性。将材料的浸提液与rBMSCs共培养,通过对细胞呼吸链活性（CCK-8）和细胞乳酸脱氢酶（Lactate dehydrogenase,LDH）的检测,证明了所制备复合支架良好的细胞相容性。采用兔桡骨骨髓炎模型研究了4%AHRG的体内的抗菌和成骨活性。以不同时间点的超敏C反应蛋白（C-reactive protein,CRP）和白细胞（White blood cell,WBC）的变化为指标,探讨了复合材料植入后体内感染的抑制情况。同时利用高精度的显微计算机断层扫描技术（Micro-computed tomography,Micro-CT）对损伤部位的骨修复情况进行三维评价和比较。最后结合组织学分析结果,证实了所制备的4%AHRG多孔支架具有良好的体内抗菌和促进感染性骨缺损愈合的作用。而且在治疗结束3个月以内,并未观察到感染的复发,显示了其对定殖于体内的多药耐药细菌的根除作用。（3）以骨肿瘤引发的骨缺损为治疗目标,受前两章中石墨烯复合材料方面成功应用的启发,设计了一种具有较强光热转化效率的石墨烯复合支架,以期通过材料的光热效应和成骨活性来协同治疗肿瘤性骨缺损。具体的,以镍（Ni）泡沫为模板,通过化学气相沉积（Chemical vapor deposition,CVD）,制备了孔径大小均一的石墨烯多孔支架（G）,并通过改进的半干式电化学沉积方法,在支架的表面和内部均匀的负载上了羟基磷灰石涂层,得到了石墨烯/羟基磷灰石支架（HA@G）。与前面两章使用的自组装方法得到复合材料不同,本章中制备的支架是由没有任何结构缺陷的石墨烯层层生长而成,其导电性和光热转换效率相对于RGO均有明显的提高。此外,利用所制备支架良好的导电特性,以改进的半干式电化学沉积法,使电流全层穿过吸附有电解液的多孔石墨烯支架,在加速矿化速度的同时还改善了沉积物在支架中的分布,克服了以往沉积层在电极/电解液界面过度生长导致的分布不均问题。通过SEM和XRD分析了材料的形貌和物相结构,发现电沉积的时间和加载在石墨烯支架两侧的电压对沉积物的结构有很大的影响,当电压为10伏特（V）,沉积时间为4分钟（min）时,可以得到孔道结构清晰,表面矿化物均匀的HA@G支架。体外细胞实验表明,矿化后的石墨烯能够有效的提高rBMSC在其上的扩增和成骨分化能力。特别的,HA@G支架在体外980 nm波长0.6 W/cm2光密度功率的近红外光的照射下可以在10 min内上升到50 oC,显示了其优异的光热转化能力。体内的热成像确证了体外的实验的结果,并且还发现在该光源参数下小鼠身体其他部位的温度始终没有明显的波动,揭示了该支架在体内应用的安全性。最后,分别通过小鼠的肿瘤和大鼠的颅骨缺损模型验证了HA@G的体内抗肿瘤和促成骨的治疗效果。综上所述,本论文主要针对各种难愈合骨缺损的治疗难点,利用石墨烯基材料为基础单元,通过各种组装和修饰制备了特定功能的仿生矿化三维多孔支架,研究了支架的植入对损伤部位病理环境的影响,考察了所制备支架的体内外成骨活性。本论文为临床上难愈合性骨缺损的治疗提供了若干新的途径和研究视角,也为理解石墨烯基材料在各种成骨微环境中的作用机制提供了初步的体内实验依据。
颜菖[5]（2019）在《AuNPs@LL37/pDNAs复合物对糖尿病创面血管生成和创面愈合影响的研究》文中认为目的:探讨AuNPs@LL37/pDNAs复合物作为VEGF基因载体对糖尿病创面血管生成和创面愈合的影响。方法:以聚乙烯亚胺（PEI）为稳定剂,对AuNPs（还原法制备）进行包裹后,进行配体交换,获得LL37肽修饰的AuNPs（AuNPs@LL37）,最后通过静电相互作用凝聚带负电荷编码VEGF165的质粒DNA嵌入于AuNPs@LL37中,形成AuNPs@LL37/pDNAs。在体外试验中,以Lipo2000/质粒DNA（pDNAs）复合物作为阳性对照,探讨AuNPs@LL37/pDNAs基因传递效能,通过对细胞绿色荧光蛋白（GFP+）流式检测等方法,探讨AuNPs@LL37/pDNAs基因传递的机制。进一步在糖尿病小鼠创面模型进行体内AuNPs@LL37/pDNAs创面愈合实验,通过HE染色及免疫组化染色,探讨其对VEGF表达、血管新生及创面愈合效果,同时采用CCK8细胞毒性实验及动物血液生化分析及主要脏器HE染色观察AuNPs@LL37/pDNAs在体外体内生物相容性及抗菌效果。结果:（1）选取质量比（AuNPs@LL37:pDNAs）为5:1,成功制备AuNPs@LL37/pDNAs复合物,使其平均粒径为80-130 nm,表面带正电荷。（2）AuNPs@LL37/pDNAs在细胞培养基中表现出良好的稳定性与低毒性,以Lipo2000/pDNAs为阳性对照组,AuNPs@LL37/pDNAs处理组具有相当的传递基因能力,在VEGF表达水平方面,AuNPs@LL37/pDNAs组（2235.28±146.22 pg/mL）也与Lipo2000/pDNAs组（2289.07±104.10 pg/mL）相当。于此同时,AuNPs@LL37/pDNAs通过能量依赖性和肌动蛋白依赖性途径实现高效细胞摄取、核靶向能力及入核能力。在对革兰氏阳性细菌病原体MRSA抗菌性方面,AuNPs@LL37/pDNAs具有与万古霉素相近的抗菌活性。（3）以创面初始面积缩小50%以上作为创面闭合的宏观指标,AuNPs@LL37/pDNAs处理组平均创面闭合时间显着优于其他组;通过测量了新表皮的长度和肉芽组织的厚度进行分析,AuNPs@LL37/pDNAs处理组中发现了明显更厚的肉芽组织及新表皮显着生长（p<0.05）。免疫组化检测CD31,观察微血管的形态,显示肉芽组织中的血管生成,AuNPs@LL37/pDNAs组（p<0.05）中观察到新生修复血管,血管内皮生长因子表达显着增加。对感染的糖尿病急性创面进行组织学检查,观察创面损伤后第14天的显微外观形态。与对照组相比,AuNPs@LL37/pDNAs处理组炎性细胞数量明显减少,皮下浸润的新生毛细血管数量明显多于其他处理组。与万古霉素组相比,AuNPs@LL37/pDNAs处理组炎症细胞数量相似,并且新生毛细血管数量更多。这一结果表明AuNPs@LL37/pDNAs具有与万古霉素相似的杀菌活性,在测试浓度下具有更好的改善血管生成的能力。结论:AuNPs@LL37联合促血管生成因子（VEGF）质粒（AuNPs@LL37/pDNAs）与原始AuNPs/pDNAs相比,显着提高了细胞的基因转染效率,与高效基因转染剂Lipo2000/pDNAs表达相似,可促进糖尿病创面的血管生成和抑制细菌的感染,从而加快伤口闭合率和高VEGF表达。AuNPs@LL37/pDNAs是一种安全、高效的转染VEGF基因载体,同时还有抗炎效果,具有良好的生物应用基础及进一步转化应用于糖尿病合并心肌梗死、慢性心肌缺血、肢体缺血模型研究潜能。
王海淋[6]（2019）在《不同硬度硅橡胶对人真皮成纤维细胞增殖和胶原合成的影响》文中研究指明研究背景和目的硅橡胶（Silicone Rubber,SR）由于具备在体内不变性、不降解等稳定的理化特性,成为目前整形外科最常用的植入假体材料,如硅胶鼻假体、硅胶乳房假体、扩张器等。但受限于硅橡胶假体表面与人体组织的低相容性,最终会形成由大量胶原蛋白和少量成纤维细胞组成的纤维包膜将假体包裹其中。随时间进展,包膜可逐渐增厚,在一定诱因下还可发生挛缩,最终导致假体变形移位,引起局部发硬、疼痛、畸形等,严重影响手术预后及患者生活质量。包膜的形成和挛缩是在异物存在情况下植入创面愈合的结局,这一过程与成纤维细胞的生物行为密切相关。研究表明生物材料表面的物化性能如表面硬度、形貌、亲疏水性、电荷、化学基团等对细胞的粘附、増殖及分化等生物行为产生影响。探明硅胶橡假体表面物化性能与成纤维细胞生物行为之间的关系,对明确硅橡胶假体相关并发症的病因,寻求构造性能更优的硅橡胶材料,提高临床治疗效果具有重要价值。本课题旨在通过探讨硅橡胶硬度对人真皮成纤维细胞（Human Dermal Fibroblasts,HDFs）增殖以及胶原合成的影响,为开发更优硅橡胶材料提供思路。研究方法一、不同硬度SR的制备及表面性能检测1、室温下将液态A、B型硅胶按1:9,2:8,…,9:1的比例充分混合,采用特制模具制备100 mm×100 mm×1 mm规格的硅橡胶膜,静置固化后选取表面光整、无气泡的硅橡胶膜备用。2、表面硬度检测:采用邵氏A型硬度计对各个硅橡胶样本的表面硬度进行测量（注:A:B=1:9组在室温条件下未达到完全固化,弃用）。3、拉伸强度和断裂伸长率检测:应用微机万能材料试验机进行拉伸试验,检测各组SR的抗拉伸强度和断裂时的伸长率。4、表面形貌对比:应用原子力显微镜（AFM）检测对比硬度最高和最低的两组硅橡胶样本的表面微形貌。5、表面化学基团及元素组成对比:应用傅里叶变换红外光谱仪（FTIR）及X-射线电子能谱仪（XPS）检测对比硬度最高和最低的两组硅橡胶样本表面的化学官能团和组成元素。6、表面亲疏水性对比:应用水接触角测定仪测定上述两组硅橡胶样本的表面水接触角。二、不同硬度SR对成纤维细胞增殖及胶原合成的影响1、成纤维细胞的获取:从健康男童包皮（取得患者知情同意并通过伦理学审查）提取原代真皮成纤维细胞,传代后取第4代以后细胞进行后续实验。2、观察细胞在硅橡胶材料表面的粘附情况:将HDFs接种在不同硬度硅橡胶表面,分别在24 h、48 h、72 h在倒置显微镜下观察细胞贴壁生长情况及细胞形态。3、细胞增殖实验:应用CCK-8试剂盒（Cell Counting Kit-8）检测HDFs在不同硬度硅橡胶材料上的细胞增殖情况并进行对比评价。4、对HDFs合成胶原的检测:选取所有SR样本中硬度最高（Stiff组,A:B=9:1）、硬度最低（Soft组,A:B=2;8）（同时也是成纤维细胞增殖差异最大的两组）的硅橡胶样本进行实验。分别采用α-SMA ELISA试剂盒、CollagenⅠELISA试剂盒检测两组硅橡胶上HDFs表达α-SMA及CollagenⅠ的情况,并进行评价对比。三、SR硬度影响成纤维细胞增殖及胶原合成的初步机制探索1、实验分组:正常组:Soft+PBS,Stiff+PBS;3-MA 组:Soft+3-MA（5 mM）,Stiff+3-MA（5 mM）;雷帕霉素组:Soft+雷帕霉素（100 nM）,Stiff+雷帕霉素（100 nM）。2、自噬标志蛋白的检测:将HDFs接种到硅橡胶材料上,预培养24 h后,加入上述自噬抑制剂及诱导剂,处理后4 h,运用Western Blot法分别检测各组硅橡胶上HDFs表达自噬标志蛋白Beclin 1、LC3Ⅱ、p62的情况,并进行对比评价。3、自噬对HDFs增殖的影响:应用CCK-8试剂盒检测上述各组处理后细胞增殖情况,并通过激光共聚焦显微镜观察各组硅橡胶材料上HDFs表达细胞骨架蛋白（F-actin）的情况。4、自噬对HDFs胶原合成的影响:采用α-SMA ELISA试剂盒、CollagenⅠELISA试剂盒检测3-MA组、雷帕霉素组硅橡胶上HDFs表达α-SMA及CollagenⅠ的情况,并进行评价对比。研究结果1、采用简易法制备了8组不同硬度的硅橡胶薄膜材料,并对各组的邵氏硬度进行了定量测定,发现随着B型液态硅胶占比增加,硅橡胶的硬度逐渐下降,所有材料的邵氏硬度介于3.013.0 HA之间。2、拉伸试验结果显示随着SR硬度增加,材料的断裂伸长率相应增加,但硬度过高和过低时,SR的拉伸强度均较低。3、用AFM观察了Stiff组、Soft组硅橡胶的表面形貌,结果证实两组无显着差异,表面形貌在该实验中不是导致细胞生物行为差异的因素。4、FTIR及XPS检测结果均无显着差别,说明两组SR的表面化学官能团不存在明显差异,表面化学性能不是造成细胞生物行为差异的因素。5、两组SR表面水接触角结果无显着差别,说明硬度改变并未造成SR表面的亲疏水性改变。6、通过观察HDFs在各组不同硬度SR表面的粘附情况,细胞均可良好地贴壁生长,细胞形态呈正常成纤维细胞形态,铺展充分,说明A、B型硅胶的不同比例组合并无明显的细胞毒性。7、增殖实验结果显示HDFs的增殖能力随着硬度的增加而增加,在Stiff组上明显优于Soft组。表明SR的硬度对HDFs的增殖有显着影响——高硬度SR促进HDFs增殖。8、ELISA检测HDFs表达α-SMA及CollagenⅠ的结果显示,Soft组上细胞表达达α-SMA及CollagenⅠ均显着高于Stiff组,表明SR硬度可显着影响HDFs的胶原合成以及影响成纤维细胞向肌成纤维细胞转化。9、自噬相关标志蛋白检测及干预细胞自噬后的相关实验结果显示,抑制自噬可以一定程度抑制HDFs增殖并增强α-SMA和CollagenⅠ的表达量,促进自噬可一定程度促进HDFs增殖并降低α-SMA和CollagenⅠ的表达量。研究结论1、经A、B型硅胶通过物理混合制备的不同硬度硅橡胶材料,除硬度不同外,其余表面物化性能无显着差异,可以基本确定硅橡胶硬度是影响该研究结论的主要因素。2、硅橡胶硬度是影响HDFs增殖及其向肌成纤维细胞转化、胶原合成的一个重要因素。3、细胞自噬可能是硅橡胶硬度影响HDFs增殖及其向肌成纤维细胞转化、胶原合成的途径之一,但SR硬度具体如何介导细胞自噬还待进一步深入研究。
张书江[7]（2018）在《聚乙烯醇基复合功能水凝胶敷料的制备及用于浅表皮肤创伤修复的研究》文中研究指明浅表皮肤创伤是临床医学和美容整形领域常见的病例,设计研发具有创伤修复的生物医学功能敷料正成为研究的热点和解决创伤修复问题的重要途径之一。传统的创伤敷料在创伤修复的过程中容易对伤口造成二次伤害且在伤口的愈合过程中容易感染细菌,造成伤口的愈合速度减慢。水凝胶具有一定的保湿性能并方便负载活性物质有利于伤口的快速愈合。本文拟以聚乙烯醇（PVA）为基本材料制备水凝胶,并加入具有抗菌性能的壳聚糖（CS）,以及在表面喷涂皮肤愈合过程中所需的胶原蛋白（COL）,制备成具有抗菌和生物活性的水凝胶。利用激光束建立不同创伤深度的浅表皮肤创伤动物模型,并探究所制备的复合水凝胶对这些浅表创伤的修复,探明所设计的功能性水凝胶敷料应用于浅表创伤修复的可行性。本文采用聚乙烯醇为基材,壳聚糖为抗菌剂,胶原蛋白为皮肤修复活性组分。通过冷冻-解冻的方法制备出不同配比的复合水凝胶（PVA-2%CS、PVA-5%CS、PVA-10%CS）,对其进行力学性能、保湿性、抗菌性、蛋白释放和细胞毒性进行测试,得到了物理性能和生物学性能等综合性能优的复合水凝胶敷料PVA-5%CS。在冷冻-解冻循环的过程中在复合PVA-5%CS凝胶上面喷涂COL,制备出负载修复活性成分的PVA-5%CS-COL复合水凝胶。采用激光照射SD大鼠背部区域制备不同深度浅表创伤模型,成功制备出了浅I、浅II、深II度创伤动物模型,并通过对创伤修复的大体观察、H&E染色分析PVA-5%CS-COL复合水凝胶对SD大鼠不同深度皮肤创伤的修复效果。结果表明通过对创伤伤口进行贴敷水凝胶敷料,伤口的愈合时间明显缩短;PVA/CS/COL水凝胶能够更好的促进创伤皮肤的愈合、上皮层快速形成以及减少创伤修复后瘢痕组织的生成。研究表明PVA/CS/COL有望作为一种新型的功能性水凝胶敷料应用在临床和医学美容整形领域。
吴亮[8]（2017）在《异种脱细胞真皮基质修复外耳肿物切除术后皮肤缺损的临床应用》文中进行了进一步梳理目的探讨采用异种脱细胞真皮基质（acellular dermal matrix,ADM）修复耳廓/外耳道肿物切除术后皮肤缺损的临床效果。方法收集2013年1月至2016年3月应用异种脱细胞真皮基质修复耳廓/外耳道良、恶性肿物切除术后皮肤缺损的40例患者资料,其中耳廓肿物14例,外耳道肿物26例,术后随访观察6个月,评价ADM植入后效果。结果术后观察至6个月,所有患者创面愈合良好,无明显疤痕和挛缩,无外耳道狭窄及闭锁,无移植区排斥反应,亦无全身不良反应。结论异种脱细胞真皮基质是修复耳廓/外耳道肿物手术切除后皮肤缺损简单、安全、可靠的方法,并可获得较为满意的效果。
冯鑫[9]（2017）在《辐照灭菌法对生肌膏药效影响的多元化评价》文中研究指明目的:以中药血清药理学为基础,利用图谱分析技术、细胞检测技术、数理统计学以及中药谱效关系理论,考察生肌膏经辐照灭菌达到无菌标准后,是否会对药品疗效产生影响,以评价生肌膏选用辐照灭菌工艺的可行性。方法:1.家兔疮疡造模成功后,随机分成未辐照和辐照两组,分别使用辐照前后的生肌膏换药治疗。在用药第3d、6d、9d、12d、15d时观察创面愈合情况,同时取血,分离载药血清,-80℃冻存、备用;15d后处死家兔,切除创口愈合处皮肤,制成病理切片、镜下观察。另外筛选符合条件的受试者,随机分组,换药治疗,在治疗的第0d、9d,采集创面分泌物分析创面感染变化情况。2.建立载药血清中游离氨基酸指纹图谱,分析不同时间点载药血清中游离氨基酸的变化幅度及变化时间。3.采用MTT实验法,测定两个实验组不同时间点载药血清的OD值;使用流式细胞检测技术,测定两组载药血清对细胞凋亡率。分别以OD值和凋亡抑制率为评价指标,分析生肌膏辐照灭菌后对人真皮成纤维细胞增殖与凋亡的影响。4.利用上述实验所得的指纹图谱和细胞实验数据,采用SPSS及Excel统计分析软件,分别用双变量相关性分析、多元线性回归分析及灰色关联度分析等方法,对数据进行相关性分析。建立载药血清游离氨基酸和疮疡愈合疗效之间的谱效关系,分析辐照对生肌膏疗效的影响。结果:1.两实验组家兔创面愈合情况类似:用药第3d,创面肉芽组织生长,15d创面基本完全愈合。病理切片镜检可见,两组创面均有大量成纤维细胞生长,未辐照组可见大量嗜酸性细胞灶性聚集,毛细血管数量较辐照组多。受试者创面感染情况比较,无差异（P=0.881,>0.05）。2.氨基酸分析仪建立载药血清游离氨基酸指纹图谱,检测牛磺酸（Tau）、苏氨酸（Thr）、丝氨酸（Ser）、谷氨酸（Glu）、甘氨酸（Gly）、丙氨酸（Ala）、缬氨酸（Val）、甲硫氨酸（Met）、异亮氨酸（Ile）、亮氨酸（Leu）、酪氨酸（Tyr）、苯丙氨酸（Phe）、鸟氨酸（Orn）、赖氨酸（Lys）、组氨酸（His）、精氨酸（Arg）、脯氨酸（Pro）等17种氨基酸含量。与空白兔血清相比,除Tau和Glu外,两组均有15种游离氨基酸含量的最大降幅超过40%。未辐组降幅范围为42.58%96.12%;辐照组为41.95%90.64%,变化排名的前4位均是Gly、Leu、Orn和Pro,从氨基酸变化幅度分析,两组不存在差异。从含量变化时间分析,两组变化过程略有不同,但整体趋势不存在差异。3.细胞增殖和凋亡实验结果显示两组均有明显的细胞增殖促进作用和对细胞凋亡的抑制作用,但在影响时间和作用强度上存在着较为明显的差异。4.建立载药血清游离氨基酸与人真皮成纤维细胞增殖和凋亡作用的谱效关系,并进行综合评价分析。双变量相关性分析显示:Gly,Lys与细胞增殖密切相关（Pearson指数分别为0.725和0.695,P<0.05）;Orn与细胞凋亡抑制率密切相关（Pearson指数为-0.653,P<0.05）。多元线性回归分析:将细胞增值率设定为Y1,多元回归方程为:Y1=-1.012-0.012X3+0.004X4+0.001X6+0.016X7+0.002X13+0.000X14-0.017X15-0.001X16+0.000X17（R=1.000）;细胞凋亡抑制率设定为Y2,多元回归方程为:Y2=186.972+0.275X3-0.032X4-0.157X6-0.429X7-0.276X13+0.275X14+0.262X15-0.134X16+0.113X17（R=1.000）。回归分析显示只有Ser、Glu、Ala、Val、Orn、Lys、His、Arg、Pro等9种氨基酸与成纤维细胞的增殖和凋亡有关。灰色关联度分析显示:游离氨基酸与增殖作用的关联度排序为Met>Lys>0.7>Orn>Ile>Phe>Pro>Val>His>Tyr>Glu>Leu>Ala>Tau>Ser>Thr>Gly>Arg>0.6;与凋亡抑制作用的关联度排序为Tau>Ser>Ile>Phe>His>Val>Tyr>Leu>Thr>Glu>Arg>Ala>Met>Lys>Pro>Orn=0.700>Gly>0.6。综合三种统计分析结果证明:Lys与人真皮成纤维细胞增殖明显正相关;Orn与细胞的凋亡抑制明显负相关;Glu、Ala、Val、Arg等4种氨基酸与凋亡抑制负相关,而Gly则可判断为与凋亡抑制无关。比较两实验组中确认相关的游离氨基酸含量变化,未证明辐照前后的生肌膏在对真皮成纤维细胞增殖和凋亡方面的疗效存在差异。结论:通过对辐照前后生肌膏的临床疗效、载药血清氨基酸分析、载药血清对人真皮成纤维细胞增殖与凋亡的的影响以及谱效关系的分析证实:生肌膏采用辐照工艺灭菌是可行的。
刘兆路[10]（2017）在《人纤维蛋白粘合剂对家兔的刺激性和对创口愈合的促进作用》文中研究指明纤维蛋白粘合剂主要由纤维蛋白原和凝血酶两种组分组成,具有良好的组织相容性、止血和粘合性能。在少量Ca2+和凝血因子ⅩⅢ存在的情况下,纤维蛋白原在凝血酶的作用下转化为不可溶的纤维蛋白,从而达到粘合组织、覆盖创面、填充缺损和空隙等作用。目前对于纤维蛋白粘合剂的研究及应用主要针对人局部止血,辅助用于处理烧伤创面、普通外科腹部切口、肝脏手术创面和血管外科手术创面的渗血,也用于伤口促愈合、手术防粘连以及药物缓释,但对动物专用纤维蛋白粘合剂的研发与应用的研究很少。本文使用人纤维蛋白粘合剂进行家兔局部刺激性试验,检验人纤维蛋白粘合剂给动物用药的可行性,并且在得到可行性的结果后,进行创口愈合试验,检验人纤维蛋白原对动物创口愈合的促进作用,为开发动物用纤维蛋白粘合剂提供理论依据。本研究主要分两部分:1.人纤维蛋白粘合剂对家兔的局部刺激性试验为评价动物使用人纤维蛋白粘合剂的可行性和安全性,进行了动物局部刺激性试验,主要包括家兔正常皮肤刺激性试验、家兔破损皮肤刺激性试验和家兔皮下植入局部反应试验。在家兔给予人纤维蛋白粘合剂对正常皮肤刺激性试验中观察家兔正常皮肤多次给予人纤维蛋白粘合剂及上市产品后对给药部位的刺激性。在本试验条件下,家兔正常皮肤被多次涂布人纤维蛋白粘合剂及上市产品刺激性试验未见药物刺激性病理学改变,并且对于家兔是安全的;家兔破损皮肤多次涂布人纤维蛋白粘合剂及上市产品刺激性试验未见药物刺激性病理学改变,并且对家兔是安全的;家兔皮下植入人纤维蛋白粘合剂局部反应试验结果表明:植入人纤维蛋白粘合剂胶片对家兔临床症状、体重和摄食量变化没有明显影响;植入部位可见人纤维蛋白粘合剂胶片供试品侧与上市品侧无显着差异。试验结果表明人纤维蛋白粘合剂2.家兔创口愈合试验将18只家兔随机分为6组,分别是（1）对照组、（2）只使用本试验用纤维蛋白粘合剂组、（3）只使用上市对照品组、（4）本试验用纤维蛋白粘合剂和手术缝合联合使用组、（5）上市对照品和手术缝合联合使用组、（6）手术缝合组。按照上述分组方法分别对家兔采取相应的试验方案。试验结果如下,纤维蛋白粘合剂对促进动物伤口愈合有积极作用;本试验用纤维蛋白粘合剂在伤口闭合时间和断裂力方面能够达到上市产品的效果;使用纤维内蛋白粘合剂相比于自然愈合来说效果更好;联合使用纤维蛋白粘合剂和手术缝合对家兔伤口愈合的促进效果最好。
二、应用可溶性物表面贴敷促进创面愈合（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、应用可溶性物表面贴敷促进创面愈合（论文提纲范文）
（1）预处理的外泌体对骨质疏松骨整合及糖尿病创面修复作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 MiR-20a预处理的MSC来源的外泌体通过靶向BAMBI增强成骨作用来促进钛合金的骨整合的研究 |
| 一、研究背景 |
| 二、材料与方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 第二部分 褪黑素预处理的MSC来源的外泌体通过靶向PTEN/AKT途径来调节巨噬细胞M1 和M2 极化,从而改善糖尿病慢性伤口的愈合 |
| 一、研究背景 |
| 二、材料与方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表论文及参加科研工作情况说明 |
| 致谢 |
（2）c-Cbl对长期扩增培养的BM-MSCs用于促进血管生成及糖尿病创面愈合的影响（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| Abstract |
| 摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 长期扩增培养的BM-MSCs中c-Cbl与Akt蛋白的活化水平及相互作用关系 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 c-Cbl对长期扩增培养的BM-MSCs促血管生成相关功能的影响 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 c-Cbl对长期扩增培养的BM-MSCs促进糖尿病创面血管生成的影响 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.2 实验结果 |
| 4.3 讨论 |
| 第五章 c-Cbl对长期扩增培养的BM-MSCs促进糖尿病创面愈合的影响 |
| 5.1 材料和方法 |
| 5.2 实验结果 |
| 5.3 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 脂筏在血管生成调控中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（3）纤维基复合功能敷料的制备及性能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 伤口及敷料概述 |
| 1.1.1 皮肤组织 |
| 1.1.2 伤口分类 |
| 1.1.3 伤口愈合过程 |
| 1.2 敷料的分类 |
| 1.2.1 传统敷料 |
| 1.2.2 新型敷料 |
| 1.2.3 理想敷料的基本性能要求 |
| 1.3 新型敷料的研究进展 |
| 1.3.1 促愈合敷料 |
| 1.3.2 防粘连敷料 |
| 1.3.3 抗菌敷料 |
| 1.3.4 纳米纤维敷料 |
| 1.4 本课题的研究内容及创新点 |
| 1.4.1 研究内容 |
| 1.4.2 创新点 |
| 第二章 胶原基纳米纤维的制备与性能研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料与方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 Col/PEO纳米纤维膜的制备 |
| 2.2.4 Col/PEO静电纺丝膜的测试与表征 |
| 2.2.5 统计分析方法 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 纯胶原的可纺性研究 |
| 2.3.2 Col/PEO纳米纤维膜中PEO含量的优化 |
| 2.3.3 Col/PEO纳米纤维膜的纺丝溶剂优化 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 胶原基纳米纤维膜的交联及性能研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料与方法 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验仪器 |
| 3.2.3 Col/PEO纳米纤维膜的化学交联 |
| 3.2.4 Col/PEO纳米纤维膜的性能测试与表征 |
| 3.2.5 Col/PEO纳米纤维膜的血液相容性测试与表征 |
| 3.2.6 Col/PEO纳米纤维膜的细胞相容性测试与表征 |
| 3.2.7 统计分析方法 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 交联度测试及交联机理分析 |
| 3.3.2 Col/PEO纳米纤维膜PEO的洗脱 |
| 3.3.3 Col/PEO纳米纤维膜的结构稳定性 |
| 3.3.4 Col/PEO纳米纤维膜的力学性能 |
| 3.3.5 Col/PEO纳米纤维膜交联前后的红外光谱分析 |
| 3.3.6 Col/PEO纳米纤维膜交联后的亲水性能 |
| 3.3.7 Col/PEO纳米纤维膜交联后的热稳定性 |
| 3.3.8 Col/PEO纳米纤维膜的溶血性能 |
| 3.3.9 Col/PEO纳米纤维膜的凝血性能 |
| 3.3.10 Col/PEO纳米纤维膜的细胞增殖 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 胶原/壳聚糖基纳米纤维膜的制备及性能研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料与方法 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 |
| 4.2.3 Col/CS/PEO纳米纤维膜的制备 |
| 4.2.4 Col/CS/PEO纳米纤维膜的性能测试与表征 |
| 4.2.5 Col/CS/PEO纳米纤维膜的血液相容性测试 |
| 4.2.6 Col/CS/PEO纳米纤维膜的抗菌性能测试 |
| 4.2.7 统计分析方法 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 Col/CS/PEO纳米纤维膜的形貌及结构稳定性 |
| 4.3.2 Col/CS/PEO纳米纤维膜的分子作用力 |
| 4.3.3 Col/CS/PEO纳米纤维膜的力学性能 |
| 4.3.4 Col/CS/PEO纳米纤维膜的水蒸气透过率 |
| 4.3.5 Col/CS/PEO纳米纤维膜的血液相容性 |
| 4.3.6 Col/CS/PEO纳米纤维膜的抗菌性能 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 PVDF/ZNO纳米纤维膜的制备及防粘连性能研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料与方法 |
| 5.2.1 实验材料 |
| 5.2.2 实验仪器与设备 |
| 5.2.3 PVDF/ZnO纳米纤维膜的制备 |
| 5.2.4 PVDF/ZnO纳米纤维膜的性能表征 |
| 5.2.5 PVDF/ZnO纳米纤维膜的防粘连性能测试 |
| 5.2.6 PVDF/ZnO纳米纤维膜的抗菌性能测试 |
| 5.2.7 PVDF/ZnO纳米纤维膜的溶血性能测试 |
| 5.2.8 统计分析方法 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 PVDF/ZnO纳米纤维膜的理化性能 |
| 5.3.2 PVDF/ZnO纳米纤维膜的蛋白及细胞粘附性能 |
| 5.3.3 PVDF/ZnO纳米纤维膜的明胶蛋白凝块剥离强力 |
| 5.3.4 PVDF/ZnO纳米纤维膜的抗菌性能 |
| 5.3.5 PVDF/ZnO纳米纤维膜的浸提液细胞毒性 |
| 5.3.6 PVDF/ZnO纳米纤维膜的溶血性能 |
| 5.4 本章小结 |
| 第六章 复合功能敷料的制备及应用性能研究 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 实验材料与方法 |
| 6.2.1 实验材料 |
| 6.2.2 实验仪器与设备 |
| 6.2.3 静电纺丝膜的制备 |
| 6.2.4 复合功能敷料的制备 |
| 6.2.5 复合功能敷料的剥离强力测试 |
| 6.2.6 纳米纤维膜的结构及性能测试 |
| 6.2.7 复合功能敷料的结构及性能测试 |
| 6.2.8 复合功能敷料的止血性能测试 |
| 6.2.9 PVDF/ZnO复合功能敷料的导液性能测试 |
| 6.2.10 统计分析方法 |
| 6.3 结果与讨论 |
| 6.3.1 复合功能敷料的复合效果评价 |
| 6.3.2 PVDF/ZnO复合敷料的导液性能评价 |
| 6.3.3 复合功能敷料的吸液性能评价 |
| 6.3.4 复合功能敷料的水蒸气透过性能评价 |
| 6.3.5 复合功能敷料的凝血评价 |
| 6.4 本章小结 |
| 第七章 复合功能敷料的促愈合作用及安全性评价 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 实验材料与方法 |
| 7.2.1 实验材料 |
| 7.2.2 实验动物 |
| 7.2.3 实验仪器 |
| 7.2.4 实验试样准备 |
| 7.2.5 SD大鼠背部割伤愈合实验 |
| 7.2.6 ICR小鼠全身急性毒性实验 |
| 7.2.7 统计分析方法 |
| 7.3 结果与讨论 |
| 7.3.1 复合功能敷料的促愈合研究 |
| 7.3.2 复合功能敷料的全身急性毒性分析 |
| 7.4 本章小结 |
| 第八章 总结与展望 |
| 8.1 本论文主要研究结论 |
| 8.2 本论文进一步研究方向 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表论文及奖励情况 |
| 致谢 |
（4）功能化仿生矿化三维支架在难治愈性骨缺损治疗方面的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 骨组织的生理与再生 |
| 1.2.1 骨的形态结构 |
| 1.2.2 骨基质的组成 |
| 1.2.3 骨组织中的细胞 |
| 1.2.4 骨的生长和再生 |
| 1.3 难愈合性骨缺损的发生与常见治疗策略 |
| 1.3.1 急性大创面骨缺损的发生与治疗 |
| 1.3.2 感染性骨缺损的发生与治疗 |
| 1.3.3 肿瘤性骨缺损的发生与治疗 |
| 1.4 骨组织工程技术与骨修复 |
| 1.4.1 骨组织工程的产生和发展 |
| 1.4.2 三维多孔支架的构建 |
| 1.4.3 三维多孔支架的仿生和功能化 |
| 1.5 石墨烯材料在骨修复方面的研究 |
| 1.5.1 石墨烯材料概述 |
| 1.5.2 石墨烯材料在生物医学领域的研究 |
| 1.5.3 石墨烯材料在骨修复领域的应用 |
| 1.6 本课题的研究意义以及研究内容 |
| 1.6.1 本课题的研究意义 |
| 1.6.2 本课题的主要研究内容 |
| 1.6.3 本课题的创新点 |
| 参考文献 |
| 第二章 自组装制备nHA@RGO三维多孔支架以及其在大创面骨缺损修复方面的研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验材料与方法 |
| 2.2.1 实验材料与仪器 |
| 2.2.2 材料制备 |
| 2.2.3 材料表征 |
| 2.2.4 细胞分离和培养 |
| 2.2.5 细胞粘附和增殖实验 |
| 2.2.6 成骨分化实验 |
| 2.2.7 体内相容性评价 |
| 2.2.8 体内骨修复实验 |
| 2.2.9 组织学分析 |
| 2.2.10 统计学分析 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 自组装法制备nHA@RGO多孔支架及其机理 |
| 2.3.2 细胞在支架上的粘附和生长 |
| 2.3.3 成骨分化 |
| 2.3.4 体内相容性 |
| 2.3.5 体内动物实验 |
| 2.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 一步法制备AgNPs-nHA@RGO三维多孔支架以及其在感染性骨缺损治疗方面的研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验材料与方法 |
| 3.2.1 实验材料和仪器 |
| 3.2.2 材料制备 |
| 3.2.3 材料表征 |
| 3.2.4 细菌培养 |
| 3.2.5 抗菌实验 |
| 3.2.6 细菌生物膜抑制实验 |
| 3.2.7 体外细胞相容性实验 |
| 3.2.8 体内动物实验 |
| 3.2.9 组织学分析 |
| 3.2.10 统计学分析 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 一步法制备AHRG多孔支架 |
| 3.3.2 抗菌性评价 |
| 3.3.3 体外细胞相容性实验 |
| 3.3.4 体内感染性骨缺损的修复 |
| 3.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 快速电沉积法制备HA@G三维多孔支架以及其在肿瘤性骨缺损治 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验材料与方法 |
| 4.2.1 实验材料与仪器 |
| 4.2.2 材料制备 |
| 4.2.3 材料表征 |
| 4.2.4 细胞培养 |
| 4.2.5 支架的细胞粘附和增殖能力评价 |
| 4.2.6 体外成骨能力评价 |
| 4.2.7 体内动物颅骨缺损治疗 |
| 4.2.8 支架体外光热效率 |
| 4.2.9 体外光热抗肿瘤实验 |
| 4.2.10 体内动物肿瘤的光热治疗 |
| 4.2.11 组织学分析 |
| 4.2.12 统计学分析 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 快速电沉积法制备HA@G多孔支架及其机理 |
| 4.3.2 体外细胞实验 |
| 4.3.3 体外成骨实验 |
| 4.3.4 体内成骨实验 |
| 4.3.5 体外光热抗肿瘤实验 |
| 4.3.6 体内光热抗肿瘤 |
| 4.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 本论文主要结论 |
| 5.2 存在的问题与展望 |
| 攻读博士期间科研成果及获奖情况 |
| 1.已发表的论文 |
| 2.参与发表的论文 |
| 3.授权的专利 |
| 4.所获资助及奖励 |
| 致谢 |
（5）AuNPs@LL37/pDNAs复合物对糖尿病创面血管生成和创面愈合影响的研究（论文提纲范文）
| 英文缩写一览表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 AuNPs@LL37/pDNAs复合物的制备及表征 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.2 结果与讨论 |
| 2.3 小结 |
| 第三章 AuNPs@LL37/pDNAs体外转染VEGF及相关生物学验证 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.2 结果与讨论 |
| 3.3 小结 |
| 第四章 Au NPs@LL37/p DNAs体内转染VEGF及相关生物学验证 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.2 结果与讨论 |
| 4.3 小结 |
| 全文讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 金纳米粒子在生物医学中的应用 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（6）不同硬度硅橡胶对人真皮成纤维细胞增殖和胶原合成的影响（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 第一章 前言 |
| 1.1 课题研究意义 |
| 1.2 课题研究思路及主要研究内容 |
| 第二章 不同硬度硅橡胶材料的制备和表面性能检测分析 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 第三章 不同硬度硅橡胶对成纤维细胞增殖及表达CollagenⅠ和α-SMA的影响及初步机制探讨 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 细胞外基质硬度与组织纤维化的研究 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（7）聚乙烯醇基复合功能水凝胶敷料的制备及用于浅表皮肤创伤修复的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 皮肤创伤修复 |
| 1.1.1 皮肤创伤概述与分类 |
| 1.1.2 皮肤创伤修复过程 |
| 1.1.3 创伤敷料的研究进展 |
| 1.2 聚乙烯醇 |
| 1.2.1 聚乙烯醇的结构与性能 |
| 1.2.2 聚乙烯醇水凝胶的成胶机理 |
| 1.2.3 聚乙烯醇水凝胶的应用 |
| 1.3 壳聚糖 |
| 1.3.1 壳聚糖及其抗菌性能 |
| 1.3.2 壳聚糖作为皮肤敷料的研究进展 |
| 1.4 胶原 |
| 1.4.1 胶原的结构与性能 |
| 1.4.2 胶原在生物医学中的研究进展 |
| 1.5 皮肤创伤修复动物模型的研究 |
| 1.5.1 皮肤创伤修复动物模型建立的方法 |
| 1.5.2 激光的基本特性 |
| 1.6 本课题研究思路、内容与创新点 |
| 1.6.1 研究思路 |
| 1.6.2 研究内容 |
| 1.6.3 创新性 |
| 第二章 聚乙烯醇/壳聚糖水凝胶的制备与性能研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验试剂及仪器设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 PVA/CS水凝胶的制备 |
| 2.3.2 PVA/CS水凝胶的结构与性能表征 |
| 2.4 结果分析与讨论 |
| 2.4.1 PVA/CS水凝胶的力学性能 |
| 2.4.2 PVA/CS水凝胶的保湿性能 |
| 2.4.3 PVA/CS水凝胶的抗菌性能 |
| 2.4.4 PVA/CS水凝胶的细胞毒性 |
| 2.4.5 PVA/CS水凝胶的蛋白释放 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 动物模型建立 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验试剂及仪器设备 |
| 3.3 SD大鼠表皮创伤模型建立 |
| 3.3.1 主要试剂配制 |
| 3.3.2 模型实验动物 |
| 3.3.3 创伤模型的建立 |
| 3.3.4 创伤修复大体观察 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 创面修复大体观察 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 水凝胶敷料促进皮肤创伤伤口愈合的研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验试剂、材料与仪器设备 |
| 4.3 SD大鼠皮肤创伤修复试验 |
| 4.3.1 主要试剂配制 |
| 4.3.2 固定频率和能量下动物创伤模型的建立 |
| 4.3.3 创伤修复大体观察 |
| 4.3.4 皮肤组织切片观察 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 SD大鼠创面愈合观察分析 |
| 4.4.2 组织学H＆E染色观察 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（8）异种脱细胞真皮基质修复外耳肿物切除术后皮肤缺损的临床应用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
（9）辐照灭菌法对生肌膏药效影响的多元化评价（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 1 辐照灭菌 |
| 2 中药辐照灭菌 |
| 3 生肌膏的组方及制剂特点 |
| 4 多元化评价 |
| 5 选题意义及研究内容 |
| 一、辐照灭菌法对生肌膏治疗疮疡疗效的影响 |
| 1.1 材料和方法 |
| 1.1.1 材料 |
| 1.1.1.1 研究对象 |
| 1.1.1.2 试剂与药物 |
| 1.1.1.3 仪器 |
| 1.1.2 实验方法 |
| 1.1.2.1 建立家兔疮疡模型 |
| 1.1.2.2 家兔分组给药 |
| 1.1.2.3 创面愈合情况 |
| 1.1.2.4 受试者创面分泌物的细菌培养 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 疮疡愈合情况 |
| 1.2.1.1 肉眼观察 |
| 1.2.1.2 病理学切片 |
| 1.2.2 创面分泌物的细菌 |
| 1.3 讨论 |
| 1.3.1 灭菌方法 |
| 1.3.2 造模动物的选择 |
| 1.3.3 皮肤组织嗜酸性粒细胞增多 |
| 1.3.4 感染脓液与中药“煨脓”的区别 |
| 1.4 小结 |
| 二、生肌膏辐照前后对血清游离氨基酸变化的影响 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.1.1 研究对象 |
| 2.1.1.2 试剂与试药 |
| 2.1.1.3 仪器设备 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.1.2.1 溶液配制 |
| 2.1.2.2 血清预处理 |
| 2.1.2.3 血清氨基酸分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 血清游离氨基酸测 |
| 2.2.2 血清氨基酸含量变化趋势的比较 |
| 2.2.3 氨基酸变化幅度的比较 |
| 2.2.4 氨基酸变化时间的比较 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 氨基酸分析方法 |
| 2.3.2 氨基酸对创面愈合的影响 |
| 2.4 小结 |
| 三、载药血清对人真皮成纤维细胞增殖与凋亡的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.1.1 研究对象 |
| 3.1.1.2 试剂与试药 |
| 3.1.1.3 仪器设备 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.1.2.1 溶液配制 |
| 3.1.2.2 细胞传代培养 |
| 3.1.2.3 细胞增殖检测 |
| 3.1.2.4 细胞凋亡检测 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 细胞生长曲线 |
| 3.2.2 MTT检测结果 |
| 3.2.3 流式检测结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 细胞增殖 |
| 3.3.2 细胞凋亡 |
| 3.4 小结 |
| 四、血清游离氨基酸与成纤维细胞增殖与凋亡的谱效关系 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 谱效关系分析方法 |
| 4.1.2.1 双变量相关性分析 |
| 4.1.2.2 多元线性回归分析 |
| 4.1.2.3 灰色关联度分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 双变量相关性分析结果 |
| 4.2.2 多元线性回归分析结果 |
| 4.2.3 灰色关联度分析结果 |
| 4.2.3.1 原始数据的处理 |
| 4.2.3.2 绝对差值与两级极值 |
| 4.2.3.3 关联系数及关联度 |
| 4.2.4 综合分析评价 |
| 4.2.5 基于谱效关系分析结果判断辐照灭菌对生肌膏疗效的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 中药谱效关系的建立 |
| 4.3.2 谱效关系分析方法的选择 |
| 4.4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 附录 |
| 1. Excel随机分配表 |
| 综述 辐照灭菌对中药质量的影响 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）人纤维蛋白粘合剂对家兔的刺激性和对创口愈合的促进作用（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 动物临床手术现状和纤维蛋白粘合剂研究进展及临床应用 |
| 1.2 纤维蛋白粘合剂的研究进展 |
| 1.3 纤维蛋白粘合剂的药理特性 |
| 1.3.1 纤维蛋白粘合剂的作用机理 |
| 1.3.2 纤维蛋白粘合剂的粘结性能 |
| 1.4 纤维蛋白粘合剂临床应用 |
| 1.4.1 纤维蛋白粘合剂在胸外科和普外科的应用 |
| 1.4.2 纤维蛋白粘合剂在整形外科和耳鼻喉科的应用 |
| 1.4.3 纤维蛋白粘合剂在乳腺外科和心胸外科的应用 |
| 1.4.4 纤维蛋白粘合剂在神经外科和眼科的应用 |
| 1.4.5 纤维蛋白粘合剂在产科和泌尿外科的应用 |
| 1.5 本研究的目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 纤维蛋白粘合剂 |
| 2.1.2 试验用动物 |
| 2.1.3 相关试剂 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 纤维蛋白粘合剂的体外性能试验 |
| 2.2.2 纤维蛋白粘合剂的刺激性试验 |
| 2.2.3 人纤维蛋白粘合剂对于家兔皮肤创口愈合的作用 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 纤维蛋白粘合剂的体外性能试验 |
| 3.2 纤维蛋白粘合剂的刺激性试验 |
| 3.2.1 人纤维蛋白粘合剂对家兔正常皮肤刺激性试验 |
| 3.2.2 人纤维蛋白粘合剂对家兔破损皮肤刺激性试验 |
| 3.2.3 家兔皮下植入局部反应试验 |
| 3.3 人纤维蛋白粘合剂对于家兔皮肤创口愈合的作用 |
| 4 讨论 |
| 4.1 人纤维蛋白粘合剂对动物的刺激性 |
| 4.1.1 家兔正常皮肤多次涂布给予人纤维蛋白粘合剂的试验 |
| 4.1.2 家兔破损皮肤多次涂布给予人纤维蛋白粘合剂的试验 |
| 4.1.3 家兔皮下植入局部反应试验 |
| 4.2 纤维蛋白粘合剂对动物创口愈合的作用 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 7 致谢 |
四、应用可溶性物表面贴敷促进创面愈合（论文参考文献）
- [1]预处理的外泌体对骨质疏松骨整合及糖尿病创面修复作用的研究[D]. 刘威. 中国人民解放军海军军医大学, 2021(01)
- [2]c-Cbl对长期扩增培养的BM-MSCs用于促进血管生成及糖尿病创面愈合的影响[D]. 谌程程. 中国人民解放军陆军军医大学, 2021(01)
- [3]纤维基复合功能敷料的制备及性能研究[D]. 赵新哲. 东华大学, 2021(01)
- [4]功能化仿生矿化三维支架在难治愈性骨缺损治疗方面的研究[D]. 聂伟. 东华大学, 2019(06)
- [5]AuNPs@LL37/pDNAs复合物对糖尿病创面血管生成和创面愈合影响的研究[D]. 颜菖. 中国人民解放军陆军军医大学, 2019(03)
- [6]不同硬度硅橡胶对人真皮成纤维细胞增殖和胶原合成的影响[D]. 王海淋. 中国人民解放军陆军军医大学, 2019(03)
- [7]聚乙烯醇基复合功能水凝胶敷料的制备及用于浅表皮肤创伤修复的研究[D]. 张书江. 暨南大学, 2018(12)
- [8]异种脱细胞真皮基质修复外耳肿物切除术后皮肤缺损的临床应用[D]. 吴亮. 南京医科大学, 2017(06)
- [9]辐照灭菌法对生肌膏药效影响的多元化评价[D]. 冯鑫. 天津医科大学, 2017(03)
- [10]人纤维蛋白粘合剂对家兔的刺激性和对创口愈合的促进作用[D]. 刘兆路. 山东农业大学, 2017(01)